Analiza PCR: ce este? Cum să luați analiza PCR

Nu atât de mult timp în urmă a dezvoltat o metodă fiabilă, extrem de sensibilă și rapidă pentru diagnosticarea diferitelor boli infecțioase la om. O astfel de metodă se numește „analiza PCR“. Ce este, ceea ce este esența sa, ceea ce el poate identifica microorganismele și cum să - l, vom descrie în acest articol.

Istoria descoperirii

Inventat reacția în lanț a polimerazei (PCR) este un om de știință american Keri Myullis în 1983. Inițial, brevetat metoda de diagnostic prin „Cetus Corporation“ , în care a lucrat și creatorul său. Dar, în 1992, toate drepturile și brevetele au fost vândute la compania „Hoffman-La Roche.“ După aceea, sa dovedit că studii similare au fost efectuate în paralel și au fost raportate de către alți biologi din SUA, cum ar fi Elis Chen, David Edgar, John RRE. În 1980 , el a angajat în această problemă și oamenii de știință sovietici A. Slyusarenko A. Kaledin și S. Gorodetsky. Prin urmare, pentru a determina deținătorul drepturilor de autor unic nu a fost posibilă. Multe biochimisti restante au contribuit la dezvoltarea unor metode de reacție a polimerazei și CERN patentat inovațiile lor. La această analiză punct de PCR se realizează de-a lungul laboratoarele special amenajate.

REZUMAT PCR de diagnostic

Analiza PCR: ce este și cum funcționează? Esența metodei constă în faptul că, cu o enzimă specială ADN polimerază pentru a creste in vitro ecran anumit mediu microbiană. Pentru a face acest material ADN în mod repetat disponibile se multiplica. Astfel, prezența unui agent patogen într-un eșantion, suma va fi majorat în detrimentul manipulare de laborator biochimice și bacteriile nu va fi dificil de detectat la microscop.

Cum este studiul materialului?

Pentru a efectua analiza necesară:

• Șablonul DNA;
• Primerii materialul de legătură cu capetele fragmentului;
• enzimă ADN polimeraze termostabile;
• produse chimice, a asigura funcționarea corectă a enzimelor;
• Soluție tampon este necesară pentru crearea condițiilor adecvate pentru creșterea și dezvoltarea materialului ADN.

Pentru a efectua PCR opera 25-30 repetiții constând din trei etape: Denaturarea, recoacere și alungire.

Pentru a analiza reacția în lanț a polimezarnoy cu ajutorul unui dispozitiv special - ciclor. Echipamentul modern vă permite să instalați programul de încălzire și tuburile de răcire necesare pentru a elimina erorile în timpul diagnosticului.

În cazul în care să se aplice diagnosticul?

Metoda de reacție în lanț Polimezarnoy sunt utilizate în diferite domenii ale medicinii:

• utilizarea Forensic aceasta pentru a identifica materialul genetic, cum ar fi părul, saliva sau sânge;
• Analiza PCR a sângelui ajută la genotipare, de exemplu pentru detectarea răspunsului individuale genetice plantate la un anumit medicament;
• printr-o metodă stabilită legături de familie între oameni;
• Metoda PCR a căutat cea mai a devenit în diagnosticul medical pentru determinarea diferitelor boli infecțioase.

Ce infecții dezvăluie PCR?

Astfel, medicina a fost mult timp folosit cu succes analiza PCR. Ce este, am învățat deja. Și unii agenți patogeni pot fi detectate cu ea? PCR diagnosticat următoarele infecții :

• hepatita A, B, C;
• ureaplasmosis;
• candidoza;
• chlamydia;
• micoplasmoze;
• Vaginoza bacteriană;
• mononucleoza infecțioasă;
• trichomoniaza;
• infecția cu HPV;
• tuberculoza;
• herpes infecție a 1 și a 2-tip;
• Helicobacter pylori;
• citomegalovirus;
• difterică;
• salmoneloza;
• infecției cu HIV.

De asemenea, metodele de PCR sunt utilizate în diagnosticul cancerului.

Avantajele metodei

Diagnostic PCR are mai multe avantaje:

1. Sensibilitate ridicată. Chiar și cu doar câteva molecule de ADN microorganism Analiza PCR determină prezența unei infecții. Aceasta ajută metoda de boli cronice si latente care apar. De multe ori, în astfel de cazuri, microorganismul este necultivată în alte moduri.
2. Pentru a investiga orice material adecvat, cum ar fi saliva, sânge, selecția sexuală, păr, celule epiteliale. Cea mai comună este un test de sânge și tampon urogenitala PCR.

3. Nu este nevoie de o creștere de culturi extinse. Procesul automatizat de diagnosticare permite obținerea rezultatelor unui studiu după 4-5 ore.
4. Metoda este aproape complet autentic. Înregistrate cazuri izolate doar de rezultate fals negative.
5. Abilitatea de a identifica mai multe tipuri de agenți patogeni într-un singur material eșantion. Acest lucru viteze nu numai procesul de diagnosticare a bolii, dar, de asemenea, reduce semnificativ costurile de materiale. De multe ori, medicul prescrie o analiză cuprinzătoare a PCR. sondaj preț, constând în determinarea celor șase agenți patogeni, este de aproximativ 1500 de ruble.

Recomandări privind pregătirea pentru analiză

Rezultatele să fie valabile studiile PCR trebuie să fie testate, în urma recomandărilor pregătirilor preliminare pentru diagnostic:

1. Inainte de livrarea saliva trebuie să se abțină de la a mânca și de droguri timp de 4 ore înainte de prelevarea de probe a materialului. Imediat înainte de procedura, clătiți gura cu apă fiartă.
2. Regulile de mai sus trebuie să fie ghidate și atunci când se iau proba din interiorul obrazului. După spălare, se recomandă să efectueze un masaj usor pe piele pentru a elibera secretiile de prostata.
3. Urina este de obicei colectate de la domiciliu. Pentru a face acest lucru, trebuie să efectueze o toaletă aprofundată a organelor genitale. Într-un recipient de plastic steril este necesară pentru a colecta 50-60 ml de urină. Se recomanda pentru femei pentru a insera tamponul in vagin, iar bărbații cât mai mult posibil pentru a trage pielea ori mai mare pentru a asigura puritatea materialului. Nu puteți lua materialul în timpul menstruației.
4. Pentru livrarea de sperma să se abțină de la actul sexual in timpul celor 3 zile înainte de colectarea materialului. De asemenea, medicii sunt sfătuiți să renunțe la utilizarea de saună și baie fierbinte, alcool si alimente condimentate. Timp de 3 ore înainte de analiză este necesar să se abțină de la urinat.
5. Pentru a trece urogenitala frotiu, de exemplu, în cazul în care analiza pe o chlamydia PCR, atât pentru femei cât și bărbați este recomandat ca sexual de odihnă timp de 3 zile. 2 săptămâni înainte de analiza nu poate lua antibiotice. Pentru o săptămână, aveți nevoie pentru a opri utilizarea geluri intime, unguente, supozitoare vaginale, dusurile. 3 ore înainte de studiu trebuie să se abțină de la urinat. În timpul menstruației materialului gard nu se realizează, la numai trei zile după încetarea spotting poate lua frotiu urogenital.

PCR în timpul sarcinii

Perioada de așteptare pentru un copil, multe boli infecțioase, boli cu transmitere sexuală, sunt extrem de periculoase pentru dezvoltarea normala fetale. Boli cu transmitere sexuala pot declanșa dezvoltarea intrauterină, avort spontan sau naștere prematură, malformații congenitale ale copilului. Prin urmare, este important pentru a obține în timpul sarcinii devreme de screening PCR. Pass analiză este necesară atunci când înregistrarea - până la 12 săptămâni.

Material gard vine din canalul de col uterin cu o perie speciala. Procedura este nedureroasă și nu prezintă nici un pericol pentru copil. In mod normal in timpul sarcinii analizate pentru metoda Chlamydia PCR, precum ureaplasmosis, micoplasmoze, citomegalovirus, herpes, papilomavirus. Un astfel de complex de examinare numit PCR 6.

PCR pentru diagnosticul HIV

Datorită faptului că metoda reacției în lanț a polimerazei este foarte sensibil la schimbările în organism și condițiile de diagnostic, mulți factori pot afecta rezultatul. Prin urmare, analiza PCR pentru infecția cu HIV nu este o metodă sigură, eficacitatea sa - 96-98%. 2-4% Restul testului dă rezultate fals pozitive.

Dar, în unele situații, fără diagnostic PCR HIV nu se poate face. De obicei, aceasta se face la persoanele cu ELISA fals-negativ. Aceste cifre indică faptul că persoana nu a dezvoltat inca anticorpi la virusul și nu pot fi detectate fără a mări numărul de multiple. Că acest lucru poate fi realizat prin efectuarea unei metode PCR test de sange.

De asemenea, este nevoie de un diagnostic de copii primul an de viață, născuți din mame HIV pozitive. Metoda este singura modalitate de a determina în mod fiabil starea copilului.

PCR pentru diagnosticul hepatitei

reacție în lanț a polimerazei poate detecta ADN-ul virusului hepatitei A, B, C, cu mult înainte de formarea de anticorpi la infecție sau la debutul simptomelor bolii. Deosebit de eficientă este analiza PCR privind hepatita C, deoarece 85% din astfel de boli sunt asimptomatice și fără tratament în timp util devine cronica.

detectarea din timp a agentului patogen va ajuta la evitarea complicatiilor si tratamentul pe termen lung.

screening-ul integrat al PCR

Analiză cuprinzătoare PCR: ce este? Acest studiu de reacție în lanț metoda polimezarnoy, care include definirea mai multor tipuri de infecții: genitalium Mycoplasma, Mycoplasma hominis, Gardnerella vaginalis, Candida, Trichomonas, citomegalovirusul, urealitikum ureaplasme, herpes 1 și de tip 2, gonoreea, papilomavirus uman. Prețul acestui diagnostic variază de la 2.000 la 3.500 de ruble. in functie de clinica, materialele si echipamentele, precum și tipul de analiză: calitativă sau cantitativă. Ceea ce este necesar în cazul dumneavoastră - medicul decide. În unele cazuri, doar pur și simplu detecta prezența agentului patogen în altele, cum ar fi HIV, rolul important jucat de titru cantitativ. denumite „Analiza PCR a 12“ în diagnosticul tuturor examinării patogenii de mai sus.

Descifrarea rezultatele analizei

Analiza Transcriere PCR este simplă. Există doar 2 scară de index - „pozitiv“ și „negativ“. La detectarea agentului patogen poate medici cu încredere de 99% -lea confirma prezența bolii și pentru a începe tratamentul pacientului. În metoda cantitativă de determinare a infecției la un număr de index coloană corespunzător de bacterii detectate vor fi specificate. Numai un medic poate determina extinderea bolii și prescrie tratamentul necesar.

În unele cazuri, de exemplu în determinarea infecției cu HIV prin PCR, cu un rezultat negativ, este nevoie de studii suplimentare pentru a confirma aceste cifre.

În cazul în care pentru a obține testate?

În cazul în care trece-PCR analiza in clinica publica sau un laborator privat? Din păcate, în echipamentul instituțiilor medicale municipale și metode sunt adesea depășite. Prin urmare, este mai bine să acorde prioritate laboratoarelor private cu echipamente moderne și personal cu înaltă calificare. În plus, într-o clinică privată veți obține rezultate mult mai rapid.

La Moscova, multe laboratoare private oferă analize PCR pentru diverse infecții. De exemplu, în clinici, cum ar fi „Vita“, „Clinica integrată“, „fericit de familie“, „Uro-Pro“, efectuat analiza PCR. Prețul sondaj este de 200 de ruble. pentru determinarea unui agent patogen.

Se poate concluziona că diagnosticul bolilor infecțioase prin PCR în cele mai multe cazuri, este o modalitate rapidă și fiabilă pentru detectarea agentului patogen în organism la stadiile timpurii ale infecției. Cu toate acestea, în anumite cazuri, pentru a alege alte metode de diagnostic. Se determină necesitatea unui astfel de studiu poate fi doar un specialist. PCR Analiza Decriptarea necesită, de asemenea, o abordare profesională. Urmați sfatul medicului dumneavoastră și nu dau propriile lor teste, care nu sunt necesare.