Ce este un studiu bacteriologic? Prin ce schemă se realizează? Ce se înțelege prin siguranță în acest caz? Care sunt obiectivele și etapele cercetării bacteriologice?
Informații generale
Cercetarea bacteriologică este un proces științific în care bacteriile sunt detectate și proprietățile lor sunt studiate în scopul stabilirii unui diagnostic microbiologic. O mare importanță aici este definirea tipului sau speciei microorganismului obținut (o cultură pură este implicită). Acest lucru este însoțit de un studiu al proprietăților biochimice și fiziologice ale organismelor, precum și de tendința de formare a toxinelor. Precipitațiile și reacțiile de aglutinare sunt utilizate în aceste scopuri. De asemenea, este practicată infecția animalelor de laborator cu detectarea ulterioară a modificărilor patologice.
Lucrați cu materialul de testare
Algoritmul cercetării bacteriologice prevede respectarea strictă a unei instrucțiuni speciale. Astfel, materialul investigat trebuie să fie colectat în recipiente sterile în condiții aseptice. De asemenea, trebuie avut grijă ca livrarea la laborator să se efectueze cât mai curând posibil. Este de dorit ca probele să fie păstrate la rece. Metoda cercetării bacteriologice oferă multe situații posibile. Deci, tipul de obiect, proprietățile microorganismului și natura bolii fac adesea necesară elaborarea unor instrucțiuni individuale de lucru. În lucrare sunt folosite multe metode diferite. Una dintre cele mai frecvente este bacterioscopia. Dar dacă bacteriile nu sunt fixate, utilizați o picătură zdrobită sau îndoită. Trebuie remarcat faptul că ultimele două opțiuni se disting prin creșterea nivelului de infecție.
bacterioscopia
În acest caz, sunt utilizate frotiuri. Pentru a le crea, aveți nevoie de o picătură de lichid, care este investigată, distribuită pe suprafața diapozitivului. Transpirația ar trebui să se usuce. Acest lucru se face adesea prin mutarea medicamentului printr-o flacără obținută de la un arzător de gaz. Deși compușii de fixare pot fi utilizați ca o alternativă. Pentru a indica faptul că acțiunile pregătitoare au fost efectuate cu acest preparat, acesta este colorat. Scopul acestei manipulări este acuratețea, care este foarte importantă atunci când se efectuează cercetări microscopice și bacteriologice. La urma urmei, dacă reutilizați medicamentul pentru un alt scop, veți avea o mizerie, va fi foarte dificil să lucrați eficient cu el.
De ce bacterioscopia este atât de populară?
Nu în ultimul rând, acest lucru se datorează disponibilității acestei metode. Dacă se efectuează un studiu bacteriologic al unui preparat proaspăt, pot fi utilizate reacții microchimice sau colorare selectivă a diferitelor părți structurale ale microorganismului pentru a determina agentul patogen. Care dintre ele este mai bună? Un rezultat mai precis poate fi obținut atunci când lucrați cu un preparat colorat. În acest caz, materialul de testare este aplicat pe o sticlă pre-preparată. Și, în mod necesar, strat subțire (și dacă este posibil și chiar). După aceasta, trebuie să așteptați până când drogul se usucă în aer. Microorganismele sunt apoi fixate folosind una din metodele convenționale. După aceasta, preparatul răcit este vopsit cu vopsea diferențială sau simplă. Pentru aceasta, pot fi utilizate preparate uscate și native. După aceasta, rămâne la direcția radiațiilor ultraviolete sau scurte de culoare albastră spre locul acumulării de organisme, ceea ce face ca întreg microbul sau anumite părți ale corpului său să strălucească.
Utilizarea practică a bacterioscopiei
Este folosit pentru a diagnostica o serie de boli infecțioase. Cele mai renumite dintre ele sunt tuberculoza, gonoreea și tifosul recurent. În plus, studiul este utilizat pentru studierea întregului complex de microfloră de organe sau produse. Dar criticii indică deseori lipsa de fiabilitate și inexactitatea relativă a acestei metode.
Culturi și culturi de culturi bacteriene
Acestea sunt efectuate cu ajutorul unei pipete Pasteur. Efectuarea de studii bacteriologice și citologice este adesea dificil de implementat fără însămânțare și recoltare în timpul procesului de lucru. Când lucrarea este efectuată cu pipeta Pasteur, vârful său se desprinde cu pensete. Instrumentul în sine este apoi trecut prin flacăra arzătorului și apoi lăsat să se răcească. Apropo, atunci când semănuiți, pot fi utilizate atât medii nutritive lichide, cât și solide. Influența asupra alegerii este ceea ce obiectivele cercetării bacteriologice sunt urmărite. În acest caz, este necesar să se respecte algoritmul de lucru și siguranță. Deci, atunci când lucrați cu un mediu nutritiv lichid, trebuie să vă asigurați că nu se toarnă și se înmoaie marginile fișei și tuburilor. Atunci când cercetarea este efectuată cu material solid, un ac special este adesea folosit pentru a introduce o cultură. Când culturile sunt semănate și replantate, acestea trebuie efectuate în apropierea flăcării arzătorului de gaze. Pentru puritatea experimentului, epruveta nu trebuie să rămână deschisă mult timp. Despre instrumentul cu cultura: ar trebui să vă asigurați că nu atinge nimic. De asemenea, tehnica de cercetare bacteriologică implică arderea marginilor tubului înainte de închidere. Produsul finit ar trebui să fie semnat imediat după fabricare, pentru a evita confuzia în viitor.
Eficiența însămânțării
Se crede că această metodă permite obținerea unor date mai precise și mai fiabile în timpul diagnosticării bacteriologice decât bacterioscopia considerată anterior. În acest caz, algoritmul acțiunilor este după cum urmează:
- Inițial, cultura pură este răspândită pe suprafața mediului nutritiv, care este turnată într-un vas Petri.
- Semănarea inițială ar trebui efectuată în condiții favorabile pentru acest tip de microorganisme.
- După o zi sau două, în prezența unui mediu optim, toate coloniile potrivite sunt mutate acolo unde se pot dezvolta la maxim. Acest lucru le eliberează, astfel, de microflora străină.
Rezultatul final este o cultură a bacteriilor omogene care pot fi identificate.
Culturile pure
Dar cum sunt obținute? Pentru aceasta, se folosesc metode biologice și mecanice. În primul caz, un rol important îl joacă mediile nutritive, în care există condiții necesare pentru dezvoltarea unei anumite culturi. O abordare poate fi de asemenea folosită atunci când animalele de laborator care sunt sensibile la un anumit tip de bacterii devin infectate. Metodele mecanice se bazează pe utilizarea unui instrument steril, prin care cultura este plasată în mediul nutritiv găsit în primul, al doilea și al treilea vas Petri. Apoi, este necesar să așteptați până vor crește coloniile separate, iar de la ei va fi deja alocată o cultură pură. De asemenea, bacteriile pot fi cultivate în termostate speciale, în care temperatura unui anumit nivel este menținută (de obicei aproximativ 37 de grade). În acest caz, procesul durează aproximativ o zi. Dar, în funcție de tipul de microorganisme, pot fi stabiliți alți termeni. De asemenea, este important să aveți concentrația necesară de oxigen. Pentru a face acest lucru, utilizați diferite metode de aerare. Până acum, am vorbit despre situația în ansamblu și în general, și acum să ne concentrăm asupra a ceea ce este schema de cercetare bacteriologică.
practică
Un set de metode este adesea folosit pentru a identifica microorganismele patogene în corpul unui pacient sau purtător potențial. Materialele și metodele utilizate depind de obiectivele urmărite de analiză, precum și de mediul în care se desfășoară activitatea. În practică, bacteriile sunt cel mai adesea detectate prin însămânțarea sângelui luat de la o persoană sau un animal. Dacă leziunile locale sunt bine pronunțate, agenții patogeni pot fi găsiți în zonele cu probleme. Acest lucru este tipic pentru astfel de afecțiuni precum dizenteria, gonoreea, difteria și un număr similar. În cazuri deosebit de grave, acest proces este împărțit în etape separate de cercetare bacteriologică (care este caracteristic febrei tifoide). Fiecare dintre ele utilizează propriile metode, care vizează găsirea cauzei infecției. Să aruncăm o privire mai detaliată asupra situației cu febră tifoidă. În prima săptămână a bolii, cea mai fiabilă modalitate de a diagnostica boala este de a semăna sânge. Al doilea este examenul serologic. În a treia săptămână, examinați excrementele. Ultima metodă este verificarea convalescenților.
Identificarea unui microorganism
Începe cu procesul de colorare. Apoi urmăriți cum bacteriile pot descompune carbohidrații, aminoacizii și așa mai departe. În plus, acest proces poate fi suplimentat prin studierea altor proprietăți pe care le posedă fiecare gen sau specie de microorganisme. Ca exemplu, ar trebui să se citească posibilitățile de dizolvare a eritrocitelor diferitelor animale, efectul asupra coagulării plasmei sanguine și dizolvarea unui cheag de fibrină și așa mai departe. Toate acestea sunt trăsăturile distinctive ale reprezentanților individuali ai microproiectului. Identificarea serologică poate fi, de asemenea, utilizată pentru recunoașterea definitivă (dar aceasta se referă de obicei la bacteriile patogene care aparțin familiei intestinale).
concluzie
Trebuie remarcat faptul că un număr de microorganisme nu pot fi identificate prin metodele descrise în articol. În acest caz, practica infectării animalelor de laborator este larg utilizată. Se calculează că va exista o toxicogenitate sau patogenitate caracteristică, care nu se observă în condiții artificiale. De asemenea, infecția poate fi folosită ca o metodă de acumulare a microbilor patogeni. Și când se compară caracteristicile culturii studiate, găsite în timpul studiului proprietăților biologice, morfologice, serologice și biochimice, se poate spune că se știe cu ce fel de microbi avem de-a face. Identificarea înseamnă indicația genului, speciei și tipului de bacterii. Dacă microorganismul investigat deviază în anumite proprietăți din caracteristica tipică, atunci trebuie indicat. Un număr de specialiști consideră că, în astfel de cazuri, va fi utilă efectuarea unei re-identificări cu dublarea tuturor metodelor și tehnicilor utilizate. Uneori, cercetarea poate fi transferată la un nou nivel, ceea ce implică o abordare mai serioasă (și mai scumpă). Dacă s-au obținut rezultate negative, acest lucru indică faptul că nu există microorganisme în preparat sau nu au fost viabile. Dar pentru acuratețea studiilor, în cazul în care există suspiciuni privind un număr de purtători de bacilii (dizenterie, difterie, febră tifoidă) în astfel de cazuri, sunt prezentate teste repetate. Acest lucru este necesar pentru ca specialiștii să aibă o idee exactă asupra a ceea ce trebuie tratat.