Metode microscopică Microbiology

представляют собой способы изучения разнообразных объектов с использованием специального оборудования. metode de cercetare sunt microscopice moduri de a explora o varietate de obiecte cu utilizarea de echipamente speciale. Aceasta ne permite să ia în considerare structura substanțelor și a organismelor, a căror magnitudine este dincolo de limitele de rezoluție a ochiului uman. Articolul oferă o scurtă analiză a metodelor microscopice.

Prezentare generală

используют в своей практике разные специалисты. Metode moderne de examen microscopic folosind experți diferiți în practica lor. Printre acestea se numără virusologi, citologia, hematologie, morfologia, și altele. Principalele metode de examinare microscopice sunt cunoscute pentru o lungă perioadă de timp. Prima este o modalitate ușoară de a privi obiecte. In ultimii ani, a introdus în mod activ în practică, și alte tehnologii. . Astfel, popularitatea fazei de contrast dobândite, luminiscent, interferență, polarizare, infraroșu, ultraviolet, metoda stereoscopică de cercetare. Toate acestea se bazează pe o varietate de proprietăți ale luminii. . În plus, utilizate pe scară largă metode de microscopie de electroni. Aceste metode permit de afișare a obiectelor cu ajutorul unui flux direcțional de particule încărcate. Trebuie remarcat faptul că aceste metode de studiu sunt utilizate nu numai în biologie și medicină. в промышленности. Metoda destul de popular de studiu microscopic de metale și aliaje din industrie. Acest lucru permite studiul pentru a evalua comportamentul compușilor pentru a produce tehnologii pentru a minimiza probabilitatea de fractură și rezistență crescută.

moduri de lumină: caracteristici

и других объектов базируются на различной разрешающей способности оборудования. Astfel de metode microscopice pentru studierea microorganismelor și alte facilități bazate pe diferite rezoluție echipamente. Un factor important în aceasta este direcția caracteristicile fasciculului obiectului însuși. Acestea din urmă, în special, pot fi transparente sau opace. În conformitate cu proprietățile obiectului, schimbarea proprietăților fizice ale fluxului luminos - luminozitatea și culoarea datorită amplitudinii și lungimii de undă, planul, faza și direcția de propagare a undei. . Cu privire la utilizarea acestor caracteristici și de a construi diferite metode microscopice.

specificitate

Pentru a studia modurile de obiecte de lumină, de obicei colorat. Acest lucru face posibilă identificarea și descrie aceste sau alte proprietăți. Este necesar ca țesutul a fost fixat, deoarece colorarea dezvăluie anumite structuri exclusiv în celule ucise. In celulele vii care separa un colorant în formă de vacuole în citoplasmă. Ea nu pictează asupra structurii. Dar, cu obiectele vii și pot fi investigate cu ajutorul unui microscop cu lumină. În acest scop, mod esențial de învățare. In astfel de cazuri, un condensator darkfield. Acesta este încorporat în microscop.

Studiind obiecte nevopsite

Aceasta este realizată prin microscopie cu contrast de fază. Această metodă se bazează pe difracția fasciculului în conformitate cu caracteristicile obiectului. În timpul expunerii marcate schimbare în fază și lungimea de undă. In lentila microscopului este prezent placa translucid. Live sau fixe, dar nu obiecte pictate din cauza transparenței sale, aproape nu se schimba culoarea, iar amplitudinea fasciculului care trece prin ele, provocând doar o schimbare a fazei de undă. Dar, în acest caz, după ce trece prin obiect, fluxul luminos deviat de placa. Ca rezultat, între grinzi, lipsă prin obiectul și intra într-un fond deschis, apare diferența de lungime de undă. La o anumită valoare a efectului său vizual apare - obiectul întunecat va fi clar vizibil pe un fundal luminos sau invers (în conformitate cu caracteristicile unei plăci de fază). Pentru a obține această diferență ar trebui să fie de cel puțin 1/4 lungime de undă.

metoda Anoptralny

El este un fel de metodă de contrast de fază. Metoda Anoptralny implică utilizarea unei lentile cu plăci speciale, care schimbă doar culoarea și luminozitatea luminii ambientale. Acest lucru se extinde foarte mult posibilitățile de a studia obiecte de viață necolorate. , паразитологии при изучении растительных и животных клеток, простейших организмов. contrast de faza de cercetare aplicata metoda microscop in microbiologie, parazitologie in studiul de celule de plante și animale, protozoare. În metoda hematologie este utilizată pentru a calcula și de a determina diferențierea celulelor sanguine și a măduvei osoase.

tehnici de interferență

решают в целом те же задачи, что и фазово-контрастные. Aceste metode de cercetare microscopice rezolva , în general , aceleași probleme ca și contrast de fază. Cu toate acestea, în acest ultim caz, experții se pot observa doar contururile obiectelor. методы исследования позволяют изучать их части, выполнять количественную оценку элементов. Metodele de cercetare a interferenței microscopice ne permit să studieze partea lor, să efectueze o evaluare a elementelor cantitative. Acest lucru este posibil datorită scindării fasciculului de lumină. Un flux trece prin obiectul de particule, iar celălalt - de. În ocularul microscopului se întâlnesc și interferează. Diferența de fază rezultată poate fi determinată de greutatea diferitelor structuri celulare. Când măsurarea secvențială este cu predeterminate indicele de refracție poate fi setat țesuturi groase nefixate și obiect viu, conținutul de proteine din acestea, concentrația solidelor și a apei, și așa mai departe. Conform specialistilor de date primite sunt în măsură să evalueze în mod indirect permeabilitatea membranei, activitatea enzimelor, metabolismul celular.

polarizare

Aceasta se realizează prin intermediul Nicol prisme sau Polaroid filmy. Acestea sunt plasate între specimenul și sursa de lumină. позволяет изучать объекты с неоднородными свойствами. Metoda microscopie polarizator de cercetare in microbiologie ne permite de a studia obiecte cu proprietăți neomogene. În structurile izotrope, viteza de propagare a luminii este independentă de planul selectat. În cursul sistemelor anizotrope variază în funcție de lumina orientată pe plan transversal sau axa longitudinală a obiectului. Dacă valoarea indicelui de refracție a lungul structurii va fi mai mare decât de-a lungul transvers, creează o dublă refracție pozitiv. Acest lucru este tipic de multe obiecte biologice care au găsit o orientare moleculară strictă. Toate acestea sunt anizotrope. În această categorie, în special, myofibrils, neurofibrils, cilii în epiteliul ciliat, fibrele de colagen, și altele.

valoarea de polarizare

O comparație a naturii radiațiilor și anizotropiei indicelui de refracție al obiectului face posibilă estimarea structurii moleculare a organizației. Metoda Polarizare servește ca una dintre metodele de analiză histologice utilizate în citologie și așa mai departe. Nu doar obiectele pictate pot fi studiate în lumina. Metoda Polarizare face posibilă examinarea necolorate și nefixate - native - preparate de secțiuni de țesut.

tehnici fluorescente

Ele se bazează pe proprietățile anumitor obiecte dau strălucire în porțiunea albastru-violet a spectrului UV sau razele. Multe substanțe, cum ar fi proteine, vitamine, coenzime, medicamente, dotate cu (en) luminiscență primar. Alte obiecte incep sa straluceasca prin adaugarea unei fluorocrom - vopsele speciale. Acești aditivi sunt în mod selectiv difuze sau distribuite în structuri celulare separate sau compuși chimici. Această proprietate a stat la baza utilizării microscopiei fluorescente cu histochimice și studii citologice.

Domenii de utilizare

Folosind experți imuno-fluorescență detecta antigene virale și concentrația lor ajustate sunt identificate virusuri organisme anti și antigene, hormoni, diverse produse metabolice și așa mai departe. În acest sens, diagnosticul de herpes, oreion, hepatita B, gripa și alte infecții , folosind metode fluorescente de materiale de cercetare. иммуно-флуоресцентный способ позволяет распознавать опухоли злокачественного характера, определять ишемические участки в сердце на ранних этапах инфаркта и пр. Metoda imuno-fluorescenta microscopica detecteaza tumora malignă, determină zonele ischemice ale inimii , în primele etape ale unui atac de cord și așa mai departe.

Utilizarea de ultraviolete

Ea se bazează pe capacitatea unui număr de substanțe în celule vii sau microorganisme sunt fixe, dar necolorat transparent, în conformitate cu țesături de lumină vizibilă absorb razele UV ale unei anumite lungimi de undă. Acest lucru este valabil în special pentru compușii cu masa moleculară înaltă. Acestea includ proteine, acizi aromatici (metilalanină, triptofan, tirozină, etc.), acizi nucleici și baze purinice piramidinovye și așa mai departe. microscopie UV permite pentru a specifica locația și numărul acestor compuși. În studiul lucrurilor vii profesioniști pot observa schimbările în procesele lor metabolice.

în plus

microscopie în infraroșu este utilizat în studiu sunt opace la lumină și razele ultraviolete prin absorbție a obiectelor fluxului structurilor a căror lungime de undă de 750-1200 nm. Pentru a aplica această metodă nu este nevoie de a pre-expune droguri la tratament chimic. De obicei, metoda IR este folosită în antropologie, zoologie și alte științe industrie. În ceea ce privește medicina, această metodă este folosită în principal în oftalmologie și Neuromorphology. Studiul dimensionale obiecte prin utilizarea unui microscop stereoscopic. proiectare hardware permite monitorizarea ochiul stâng și drept, la un unghi diferit. obiecte Opac sunt investigate la o mărire relativ scăzută (de 120 de ori cel mult). Metodele stereoscopice sunt utilizate în microchirurgie, Pathomorphology în medicina legală.

microscopie electronică

Este folosit pentru a studia structura celulelor și țesuturilor în nivelurile macromoleculare și subcelulare. Microscopia electronică ne -a permis să facem un salt calitativ în domeniul cercetării. Această metodă este utilizată pe scară largă în biochimie, oncologie, virologie, morfologie, imunologie, genetica, si alte domenii. creștere semnificativă a rezoluției furnizate de echipamentele fluxului capacitate de electroni care trec prin câmpul electromagnetic în vid. Acesta din urmă, la rândul său, de a crea lentile speciale. Electronii sunt capabili să treacă prin structura obiectului sau reflectate de la ei cu abateri de la unghiuri diferite. Rezultatul este afișat pe ecranul fluorescent al dispozitivului. În cazul în microscopie de transmisie vedere plană obținută la scanarea, respectiv, înconjoară.

Cerințe preliminare

Este de remarcat faptul că, înainte de examenul microscopic electronic trece, obiectul este supus la o pregătire specială. În special, utilizarea fixare chimică sau fizică a țesuturilor și a organismelor. Material secțională biopsie și, în plus, deshidratată, este încorporat în rășini epoxidice, tăiate de sticlă sau de diamant cuțite pe secțiuni ultrasubțiri. Apoi, contrastul și studiul lor. Microscopul examinează suprafața obiectelor. Pentru a face acest lucru, au pulverizat o substanță specială în camera de vid.